DOI: https://doi.org/10.21897/rmvz.256

Comparación de metodologías moleculares para identificar el gen de la kappa caseína en ganado Holstein

Carlos Solarte P, Carol Rosero G, Yohana Eraso C

Resumen


RESUMEN

Objetivo. Comparar las metodologías moleculares, PCR-RFLPs y PCR-SSCP, para identificar las variantes alélicas del gen de la kappa caseína (CSN3) en bovinos Holstein del trópico alto de Nariño-Colombia. Materiales y métodos. Se escogieron al azar 50 vacas Holstein y mediante punción en la vena coxígea media se tomaron muestras de 5cc de sangre, que se almacenaron y preservaron en tarjetas FTA® para su posterior análisis en el laboratorio. El ADN se amplificó por PCR utilizando cebadores específicos. Los cambios en la conformación de cadena sencilla (SSCP) fueron visualizados en geles de poliacrilamida al 12%; mientras que los RFLPs se obtuvieron por digestión con tres enzimas de restricción y se visualizaron en geles de agarosa al 4%. Resultados. La metodología PCR-RFLPs fue útil para detectar mutaciones puntuales y por lo tanto se identificó un mayor número de alelos, lo que contribuye a una mejor estimación de las medidas de diversidad genética en poblaciones seleccionadas, ya que evita problemas de sobreestimación de los valores en las frecuencias alélicas. Por su parte, la técnica PCR-SSCP resultó más sencilla y económica, ideal para investigaciones en las que no existe información previa sobre los genotipos de las poblaciones bovinas y en estudios con bajos presupuestos. Conclusiones. Las dos metodologías evaluadas son herramientas moleculares que contribuyen a la orientación de los procesos de selección en los bovinos para leche, ya que identifican los alelos del gen CSN3. La diferencia radica en el costo de las mismas y en el número de variantes identificadas.


Palabras clave


Colombia; genotypes; kappa casein; PCR

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Referencias


Cervantes P. Caracterización de la composición y producción láctea en vacas de diferentes genotipos en Veracruz, México [Tesis Doctoral]. La Habana Cuba: Universidad de la Habana; 2005.

Caracterización y evaluación genética de la población bovina lechera del trópico alto de Nari-o, para la conformación de núcleos de selección. Pasto-Nari-o: Universidad de Nari-o; 2009. URL Disponible en: http://promegalac.udenar.edu.co/wpcontent/uploads/2010/05/Informe_Final_ Proyecto_48-1.pdf

Lopez V, Garrick ND, Blair HT, Holmes CW. Possible effects of twenty five years of selection and crossbreeding on the genetic merit and productivity of New Zealand dairy cattle. J Dairy Sci 2000; 83:154-163. http://dx.doi.org/10.3168/jds.S0022-0302(00)74866-1

López E, Vásquez N. Determinación del sexo y genotipificación del gen de la K-caseína en embriones bovinos. Rev Colomb Cienc Pecu 2004; 17:231-240.

Braunschweig M, Hagger C, Stranzinger G, Puhan Z. Associations between casein haplotypes and milk production traits of Swiss Brown Cattle. J Dairy Sci 2000; 86(6):564-569. http://dx.doi.org/10.3168/jds.s0022-0302(00)75007-7

Chessa S, Chiatti F, Ceriotti G, Caroli A, Consolandi C, Pagnacco G and Castiglioni§ B. Development of a Single Nucleotide Polymorphism Genotyping Microarray Platform for the Identification of Bovine Milk Protein Genetic Polymorphisms. J Dairy Sci 2007; 90:451–464. http://dx.doi.org/10.3168/jds.S0022-0302(07)72647-4

Soria LA, Iglesias GM, Huguet MJ, Mirande SL. A PCR-RFLP test to detect allelic variants of the bovine kappa-casein gene. Anim Biotechnol 2003; 14(1):1-5. http://dx.doi.org/10.1081/ABIO-120020180

Uffo O, Martín I, Martínez S, Ronda R, Osta R, Rodellar C, Zaragoza P. Caracterización genética de seis proteínas lácteas en tres razas bovinas cubanas. AGRI 2006; 39:15-24. http://dx.doi.org/10.1017/s1014233900002108

Requena FD, Agüera EI, Requena F. Genética de la caseína de la leche en el bovino Frisón (Milk of casein of genetic in the Frison bovine). REDVET 2007; 21:1695-7504.

Hoelzel A. Molecular genetics Analysis of Populations. ed 2nd. New York: Oxford University Press; 1998.

Naranjo J, Posso A, Cárdenas H, Mu-oz JE. Detección de variantes alélicas de la Kappa-caseína en bovinos hartón del Valle. ACTA AGRON (COLOMBIA) 2007; 56(1):43-47.

Solarte CE, Rosero CY, Cárdenas H, Burgos WO Eraso YM, Zambrano GL. Identificación de polimorfismos del gen de la Kappa caseína bovina: Nari-o-Colombia. Revista Lasallista de Investigación 2009; 6(2):39-45.

Barroso A, Dunner S, Ca-on J. Detection of Bovine Kappa casein Variants A, B, C y E by Means of Polymerase Chain Reactionsingle strand conformation polymorphism (PCR-SSCP). Technical note. J Anim Sci 1998; 76:1535-1538. http://dx.doi.org/10.2527/1998.7661535x

Álvarez CA, Sánchez ZB. Costos y Métodos de Costeo. Aplicación y análisis para el sector agropecuario. Medellín, Colombia: Universidad Nacional de Colombia; 1998.

Banco de la República de Colombia. Metodología de cálculo de la tasa de cambio representativa del mercado (TRM). Bogotá, Colombia: BANREP; 2004. URL Disponible en: http://www.banrep.gov.co/reglam/circularesdodm/asunto8tcrm.pdf.


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