DOI: https://doi.org/10.21897/rmvz.531

Efecto de tres diferentes fracciones de peso molecular alto del medio condicionado por células BRL en el desarrollo embrionario bovino in vitro.

Roger Salgado O., José Barrera V., Samuel Correa Q., Luzardo Estrada L.

Resumen


Para investigar la presencia de factores embriotróficos en el medio condicionado por células BRL (MCBRL), tres fracciones de peso molecular alto (>1, >5 y >10 Kda.) del MCBRL fueron adicionadas al medio TCM-199. Los oocitos fueron extraídos por el método de corte de ovarios de vacas sacrificadas en matadero, fueron madurados en una tensión del 5% de C0 2 en aire a 39ºC por 24 horas en medio TCM-199 suplementado con suero de vaca en estro al 10%. Después de la maduración, los oocitos fueron lavados tres veces en medio TL-HEPES y transferidos a las gotas de fertilización. Los oocitos fueron fertilizados en gotas de 50 ml de medio TL-FERT bajo aceite mineral espermatozoides congelados-descongelados, seleccionados por Swim-up y capacitados con heparina. Después de 18 a 20 horas post-fertilización, los cigotos fueron cultivados en MCBRL (control), fracción >1, >5 y >10 KDa. Las diferentes fracciones del MCBRL incrementaron la proporción de embriones que alcanzaron el estado de divididos (2- 8 células) después de tres días de cultivo (61-75%). La mayor proporción de embriones divididos fue alcanzada en la fracción > de 10 KDa. El desarrollo embrionario al estado de mórula/blastocisto no mostró diferencias significativas en las diferentes condiciones de cultivo (p>0.05). El recuento de núcleos no mostró diferencias significativas (P>0.05) en las diferentes condiciones de cultivo, con recuentos promedio en el rango de 15-23 células por embrión. En conclusión, los resultados muestran que la remoción de factores de peso molecular bajo del MCBRL mejoran el desarrollo embrionario al estado de divididos, pero es deficiente para promover el desarrollo mórula/blastocisto

Palabras clave


Embryo development; cattle; conditioned media; embryotrophic factors.

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