INTRODUCCIÓN

Eucalyptus es el género de árboles de madera dura más cultivado a nivel mundial, en Colombia existen aproximadamente 57 mil hectáreas sembradas (PROFOR, 2017). En las regiones tropicales del mundo se destaca por su buena adaptación y producción, la especie Eucalyptusurograndis, un híbrido de Eucalyptusurophylla S.T. (Salvador et al., 2019). Las cuales han crecido rápidamente y han tenido impactos positivos significativos en los medios de vida y el desarrollo rural (Cuong et al., 2020). Los eucaliptos se cultivan ampliamente para producir materia prima para la industria (pasta y papel, carbón vegetal, aserrado madera, paneles de madera) (Singh y Dhillon, 2020); además, son valorados por su buena adaptación a varias regiones, su rápido crecimiento, su alto rendimiento y la buena calidad de la madera empleada en diversos fines industriales (Marco de Lima et al., 2019). Sin embargo, pese a la exitosa producción forestal, existen diferentes factores que ponen en riesgo el establecimiento de este sistema productivo, como lo son los problemas fitosanitarios tanto a nivel de campo como en vivero (Simeto et al., 2020). Algunos de los patógenos que tienen un impacto significativo en la etapa de vivero son Rhizoctonia solani Kühn, que causa tizón de las hojas y pudrición de esquejes durante el enraizamiento (Da Silveira et al., 2000; Sanfuentes et al., 2007), y Cylindrocladium spp. que es uno de los géneros fungosos con mayor presencia en viveros forestales, siendo responsable de la pudrición de estacas, tizón de las ramas, defoliación severa y la mortalidad de plántulas (dos Santos et al., 2021; Klinsukon et al., 2021).

Una de las causas de la presencia de los patógenos fungosos en el vivero es el uso de sustrato contaminado con estructuras reproductivas de patógenos como clamidosporas, esclerocios, conidios de paredes gruesas o hifas, las cuales sobreviven en el suelo y tienen la habilidad de permanecer viables en capas profundas del suelo (Ajayi y Bradley, 2018; Liu et al., 2021). Estas características hacen difícil el establecimiento de programas eficaces de manejo en los viveros forestales; no obstante, para disminuir la presión de estos fitopatógenos, se recomienda realizar monitoreo constante para cuantificar la densidad del inóculo en los sustratos de los viveros (Saufuentes et al., 2002), desinfección del sustrato, usar semilla sana, realizar tratamientos de semillas con fungicidas y el uso de cultivares resistentes (Ajayi y Bradley, 2018; Rezende et al., 2019; Gullino et al., 2022).

Una de las practica más recomendable y económicamente viable para el manejo de patógenos fungosos en la fase de vivero, es la desinfección del sustrato. Entre las estrategias de desinfección más usada está la solarización del sustrato (Funahashi y Parke, 2018; Abd-Elgawad et al., 2019). Esta consiste en el calentamiento del suelo por acción del sol y un plástico transparente de polietileno de 200 μm durante 3, 6 o 9 semanas (Shlevin et al., 2018; Hasan et al., 2018). La solarización provoca la muerte de varios patógenos de plantas habitantes del suelo, como Rhizoctonia solani (Rubayet et al., 2018), Sclerotiumrolfsii (Bidima et al., 2022), Fusariumsolani y Fusariumoxysporum (Dwivedi y Dwivedi, 2020); además, su efectividad puede aumentarse combinándola con fumigantes, enmiendas orgánicas o agentes biológicos (Shlevin et al., 2018; Funahashi et al., 2022).

En el contexto de lo mencionado anteriormente, en el departamento de Córdoba no se han realizado investigaciones sobre el uso de la solarización como estrategia de manejo de enfermedades transmitidas por el suelo en viveros de Eucalipto; siendo el objetivo de esta investigación, verificar la sobrevivencia de Rhizoctonia spp. y Cylindrocladium spp. en un sustrato de vivero sometido a solarización como método de desinfección.

MATERIALES Y MÉTODOS

Ubicación y clima de la zona experimental

La investigación se llevó a cabo en el vivero “La Ribera” perteneciente a la Reforestadora del Sinú LTDA en el corregimiento de Jaraquiel del municipio Montería (Córdoba, Colombia). Ubicado a 8º 69’ 58” de latitud norte y 75º 94’ 75” de longitud oeste; mientras que, las muestras para análisis microbiológico, se procesaron en el laboratorio de fitopatología de la Facultad de Ciencias Agrícolas de la Universidad de Córdoba, con sede en Montería (Colombia) ubicado a 13 msnm, 8º 47’ 28” de latitud norte y 75º 51’ 36” de longitud oeste.

El municipio de Montería según la clasificación de Holdridge se ubica en una zona de bosque seco tropical, donde predomina un régimen térmico cálido tropical con temperaturas medias anuales de 27,5°C y la humedad relativa presenta valores superiores a 80% con máxima de 86%, el número de horas totales anuales de brillo solar es en promedio de 2000 horas (IDEAM, 2022).

Obtención de Aislamientos de Rhizoctonia spp. y Cylindrocladium spp.

En la zona de aclimatación y crecimiento de las plántulas del vivero, se colectaron plantas con síntomas de Cylindrocladium spp. y Rhizoctonia spp. Estas fueron transportadas al laboratorio de fitopatología de la Facultad de Ciencias Agrícolas de la Universidad de Córdoba, donde fueron lavadas, procesadas e incubadas en cámaras húmedas a 28°C por 72 horas (Sanfuentes et al., 2007). Se aislaron los géneros fungosos de Rhizoctonia spp. y Cylindrocladium spp., los cuales fueron purificados e identificados morfológicamente a nivel de genero (Barnett y Hunter, 1998). Los aislados fueron replicados en el medio de cultivo papa dextrosa agar (PDA).

En platos Petri con crecimientos puros de Rhizoctonia y Cylindrocladium, se introdujeron trozos de ramas verdes de Eucalipto de 6 cm de largo y 5 mm de diámetro, los cuales fueron previamente lavados en agua corriente, con posterior desinfección con alcohol al 70% y lavado con agua destilada esterilizada e incubados a 28°C, hasta que los trozos de las ramas estuvieron bien colonizados, los cuales fueron empleados para la inoculación del sustrato (Sanfuentes et al., 2002).

Establecimiento del experimento

El experimento se realizó bajo un diseño completamente al azar en arreglo factorial 2x3x3x3 que correspondió a: dos aislamientos fungosos (Rhizoctonia spp. y Cylindrocladium spp.), tres profundidades (0-5; 5-10; 10-15 cm), tres épocas de evaluación (15, 30, 55 días) y tres métodos de solarización (Libre exposición solar, solarización y la combinación solarización + 200 g m^-3 de dazomet 98%). Se establecieron tres eras, sobre una superficie de plástico negro, se distribuyó 1 m-³ de sustrato en un área de 2 x 2 x 0,15 m. El sustrato estaba conformado por 60% fibra de coco quemada y 40% cascarilla de arroz quemado, y se mantuvo a capacidad de campo. Por último, se cubrieron con plástico transparente calibre tres, exceptuando el nivel a libre exposición solar.

Con el fin de evaluar la sobrevivencia de Rhizoctonia spp. y Cylindrocladium spp., en los diferentes tratamientos, de forma aleatoria, se introdujeron nueve bolsas de malla de nylon por tratamiento que contenían cinco segmentos de tallos colonizados con Cylindrocladium spp. y cinco de tallos colonizados con Rhizoctonia spp, a las profundidades de 0-5, 5-10; 10-15 cm. De cada profundidad a los 15, 30 y 55 días después de iniciado el experimento, se extrajo una bolsa que contenía los segmentos de tallos inoculados con Rhizoctonia spp., y una con Cylindrocladium spp. Estas fueron empacadas en bolsas plásticas, etiquetadas y llevadas al laboratorio donde se lavaron con agua común, alcohol al 70%, hipoclorito al 1% y triple lavado con agua destilada estéril para finalmente ser sembrado en medio de PDA empobrecido con antibiótico, incubado a 28ºC por 96 horas y se evaluó la viabilidad de los hongos observando el crecimiento micelial en el medio de cultivo. Adicionalmente, se tomaron datos de temperatura en los tratamientos a las profundidades de 0-10 y 10-15 cm.

Análisis estadístico

Los valores de incidencia (presencia o ausencia) de los patógenos fueron sometidos a un análisis de varianza no paramétrico mediante la prueba de Kruskal-Wallis, las medias fueron comparadas con la prueba de Fisher con ajuste de Bonferroni en el programa RStudio versión 4.2.0 (R Core Team, 2022).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

El análisis de varianza no paramétrico (Kruskal-Wallis), evidenció que el efecto principal de la solarización fue significativo; mientras que, en los factores, patógenos, profundidad y el tiempo no presentaron diferencias estadísticas; además, se evidenció que la interacción de los cuatro factores fue significativa sobre la incidencia de los patógenos evaluados (Tabla 1).

El análisis de comparación múltiple mostró que la aplicación de solarización + Dazomet 98% fue la más eficaz sobre la incidencia de los patógenos (Rhizoctonia spp. y Cylindrocladium spp), el cual mostró diferencia significativa con los demás tratamientos, mientras que la solarización por si sola y el testigo a libre exposición solar no tuvieron efectos significativos sobre los patógenos estudiados y fueron estadísticamente iguales entre sí (Tabla 2).

Los resultados arrojados muestran que la presencia o ausencia del hongo está condicionada con la desinfección del sustrato; la libre exposición y la solarización por sí sola no fueron eficaces para el manejo de Rhizoctonia spp. y Cylindrocladium spp. inoculados en el sustrato, debido a que se encontró presencia de los patógenos a profundidades de 0-5, 5-10 y 10-15 cm a los 15, 30 y 55 días después de la inoculación. La combinación de la solarización más la aplicación de 200 g m^-3 de dazomet, permitió tener un manejo eficaz de los patógenos en las tres profundidades evaluadas, además, se obtuvo una reducción completa en la presencia de los hongos a partir de los primeros 15 días después de la aplicación del producto y este se mantuvo ejerciendo un manejo efectivo de los fitoparásitos durante 55 días posteriores a la inoculación del sustrato (tabla 2). Dada la efectividad de este tratamiento en el control de estos patógenos a partir de los 15 días después de su aplicación, se recomienda a partir de esa fecha suspender el tratamiento e iniciar el proceso de liberación de los residuos de la molécula química para el pronto uso del sustrato.

Los resultados de este estudio coinciden con los encontrados por Shlevin et al., (2018), donde afirman que cuando la solarización se aplicó sola, el manejo de los patógenos del suelo es bajo, mientras que cuando se combinó con fumigantes, el manejo alcanzó el 100%. Estudios similares, mostraron que la solarización por sí sola no tuvo efecto significativo sobre la severidad de Rhizoctonia solani y la supresión del patógeno mejoró al cambiarla con la aplicación de enmiendas orgánicas (Baysal et al., 2019; Jabnoun et al., 2020). Investigaciones sobre Cylindrocladium spp. demostraron que la solarización con y sin agentes de control biológico suprimen los propágulos del hongo (Mohanan, 2007; Vitale et al., 2013). La integración de fungicidas con la solarización del suelo mostró una menor severidad del “damping off” en el cultivo de ají (Kadam et al., 2018). El dazomet se ha usado en los viveros como alternativa química al bromuro de metilo, encontrándose una reducción significativa sobre la incidencia de enfermedades fúngicas transmitidas por patógenos habitantes del suelo, como lo son los géneros Rhizoctonia y Cylindrocladium (Aiello et al., 2018; Santori et al., 2020; Villarino et al., 2021; Aiello et al., 2022).

Los valores promedios diarios de las temperaturas tomadas durante el experimento, mostraron que la mayor temperatura alcanzada fue de 49ºC en los tratamientos con solarización y solarización + Dazomet; en tanto que, a libre exposición fue de 42ºC. La temperatura máxima de los sustratos solarizados se elevó en 10 y 7°C a profundidades de 0-10 y 10-15 cm, respectivamente, en comparación con el suelo no solarizado. Investigaciones han reportado que la temperatura letal para especies de los géneros Rhizoctonia y Cylindrocladium fueron de 56 y 50°C, respectivamente (Miller et al., 2018; Abd-Elgawad et al., 2019). Lo anterior apoya los resultados aquí encontrados, ya que no se logró pasar este umbral de temperatura letal por tiempo prolongado, lo cual explica la baja efectividad de la solarización por si sola en el manejo de estos fitoparásitos, siendo necesario la aplicación del fumigante dazomet.

CONCLUSIONES

La solarización sola, bajo las condiciones del vivero La Ribera, ubicado en Montería, no fue efectiva en el control de los patógenos Rhizoctonia spp. y Cylindrocladium spp., debido a que la temperatura máxima alcanzada no superó los 50 °C., considerándose este tratamiento inefectivo para el control de estos patógenos.

La solarización combinada con la aplicación de dazomet puede usarse como estrategia de desinfección de sustratos para el manejo de estos hongos alcanzando una eficiencia del 100%, a partir de los 15 días después de haberse aplicado los tratamientos.

Agradecimientos

Esta investigación fue realizada por La Facultad de Ciencias Agrícolas, Universidad de Córdoba, con recursos recibidos de la Reforestadora del Sinú durante 2019. Los autores expresan agradecimientos a los Ingenieros Dayana Tobar, Liliana Gómez, Jorge Humanez, funcionarios de la Reforestadora del Sinú, quienes apoyaron con la logística de esta investigación.

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Información adicional

Conflicto de intereses : Los autores declaran que es un trabajo original y no existió conflicto de intereses de ningún tipo en la elaboración y publicación del manuscrito.